疼痛是個(gè)復(fù)雜的神經(jīng)病理與主觀感受癥狀，產(chǎn)生的原因多種多樣。近年來(lái)，在疼痛和鎮(zhèn)痛研究領(lǐng)域已普遍重視建立模擬臨床患者急、慢性或持續(xù)性疼痛的實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ汀Ｌ弁茨Ｐ徒⒌姆椒ǹ梢远喾N多樣，一般地，有化學(xué)刺激性模型，物理刺激性模型，神經(jīng)源性損傷模型，內(nèi)臟牽拉疼痛模型以及其他多種模型。但要一個(gè)模型同時(shí)反映多種病因引起的疼痛是相當(dāng)困難的，實(shí)驗(yàn)者需針對(duì)研究的目的去選擇或建立實(shí)用的疼痛模型。現(xiàn)就近年來(lái)國(guó)內(nèi)外廣泛應(yīng)用或新近建立的疼痛模型作一簡(jiǎn)要探討。
1、化學(xué)刺激法
化學(xué)刺激法制造的疼痛模型是目前研究最多、應(yīng)用廣泛的一類疼痛模型，主要有炎性刺激致痛和藥物刺激致痛兩種。
1.1 炎性刺激致痛
1.1.1 炎劑內(nèi)臟痛模型
1.1.1.1炎劑扭體法常用腹腔注射0.6%冰乙酸0.2ml/只或0.05%酒石酸銻鉀0.2ml/只致痛。觀察10~20min扭體反應(yīng)的次數(shù)或出現(xiàn)扭體反應(yīng)的動(dòng)物數(shù)，計(jì)算鎮(zhèn)痛百分率。本法適于篩選非麻醉性鎮(zhèn)痛藥，尤其是篩選甾體抗炎藥鎮(zhèn)痛作用的一種敏感而簡(jiǎn)便的一種方法，但缺乏特異性，個(gè)體差異大，故腹腔時(shí)的部位和操作技術(shù)應(yīng)盡量保持一致。
1.1.1.2 蜂毒致結(jié)腸炎疼痛模型 在目視條件下將蜜蜂毒注入即時(shí)麻醉大鼠的乙狀結(jié)腸黏膜下，在一定時(shí)間范圍內(nèi)觀察清醒rat由于壇性內(nèi)臟痛所致的緊張性疼痛行為，如舔咬下腹部及**區(qū)域，腹部收縮，身體伸展及全身收縮。此法避免了由于腹腔注射化學(xué)刺激物造成的腹壁軀體性痛成分的介入以及大面積的彌散性臟器、黏膜以及腹腔壁層的損傷，具有行為反應(yīng)特征明顯、痛評(píng)分客觀實(shí)際、符合臨床癥狀、操作簡(jiǎn)便且重現(xiàn)性好之優(yōu)點(diǎn)，與福爾馬林致痛相對(duì)照，前者比后者第二相炎癥反應(yīng)明顯且持續(xù)期長(zhǎng)，這對(duì)炎癥性鎮(zhèn)痛藥的研究是至關(guān)重要的。
1.1.2 致炎劑致局部關(guān)節(jié)腫脹疼痛模型 方法是選用適當(dāng)?shù)闹卵讋?span style="background-color:#FFFFFF;color:#000000;font-family:微軟雅黑,sans-serif;font-size:16px;font-style:normal;font-weight:400;text-decoration:none;">rat或mouse后足跖或踝部皮下注射。如注入后0.5~1h腫脹達(dá)峰值的雞蛋清、5-HT、組織胺、緩激肽、右旋糖酐等短效致炎劑，或在注入后2~4h腫脹達(dá)峰值的福爾馬林（50μl4%）、交叉菜膠（0.1ml0.5%）、瓊脂、白陶土、酵母等中效致炎劑；甲醛（0.2mg/50μl）、氮芥、結(jié)晶尿酸鈉在注入24h后才達(dá)到峰值，持續(xù)約兩周，消退也晚，為長(zhǎng)效致炎劑。注入以后造成關(guān)節(jié)或足跖腫脹，測(cè)定足跖容積或關(guān)節(jié)周長(zhǎng)。
1.1.3佐劑關(guān)節(jié)炎模型其基本方法是在rat尾根部皮內(nèi)或足跖部注射福氏完全佐劑,注射后原發(fā)病變?yōu)橹卵拙植康难装Y反應(yīng)，致炎后8h炎癥局部即出現(xiàn)紅腫疼痛，18h可達(dá)高峰，持續(xù)6d左右，以后逐漸減退，持續(xù)數(shù)周、繼發(fā)病變一般于致炎后10d左右出現(xiàn)，表現(xiàn)為全身多發(fā)性關(guān)節(jié)損害。此模型與人的類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎很相似，其造模te異性高，假陽(yáng)性率低,被認(rèn)為是慢性痛理想的模型之一。
1.1.4鉀離子皮下透入或注射致炎性疼痛模型常用動(dòng)物為rabbit與rat，飽和KCl溶液，經(jīng)一定強(qiáng)度的直流電透入或直接注射進(jìn)入animal的不同皮下部位，引起疼痛。一般以引起上述疼痛反應(yīng)的電流強(qiáng)度（mA值）作為痛閾。該模型主要用于藥物或針刺在外周的鎮(zhèn)痛機(jī)制。
1.1.5 辣椒素靜脈推注致偏頭疼模型李樹(shù)壯等用辣椒素靜脈刺激和電刺激的方法，造成rat硬腦膜內(nèi)血漿蛋白滲出，建立神經(jīng)源性炎癥動(dòng)物偏頭痛模型。
1.2 藥物刺激致痛動(dòng)物模型
1.2.1硝酸gan油注射致偏頭疼模型rat，皮下注射硝酸gan油10mg/kg，造模后動(dòng)物出現(xiàn)雙耳發(fā)紅、前肢頻繁撓頭、活動(dòng)增多等表現(xiàn)。可能機(jī)理為，硝酸gan油在體內(nèi)生成NO，NO通過(guò)強(qiáng)烈的擴(kuò)張腦血管作用，造成無(wú)菌性眼炎癥；另一方面NO具有神經(jīng)毒性作用，可激發(fā)三叉神經(jīng)的血管反射，誘發(fā)實(shí)驗(yàn)性偏頭疼，該模型具有經(jīng)濟(jì)、簡(jiǎn)便、相似性好，實(shí)用性強(qiáng)等特點(diǎn)，已被廣泛用在偏頭疼的研究領(lǐng)域。
1.2.2利血平化低5-HT伴局部腦血管痙攣頭痛模型方法:mouse，皮下注射利血平10mg/kg，共14d。于第14天將mouse麻醉，大腦皮層注射血凝塊2μl/只。機(jī)理為單胺類神經(jīng)遞質(zhì)耗竭劑利血平能夠誘發(fā)偏頭疼，又局部注射血凝塊可以誘發(fā)腦血管痙攣。造模后，mouse凝血時(shí)間明顯縮短，痛閾值降低，全血及腦內(nèi)5-HT含量明顯下降，這些基本上反映了偏頭疼的特點(diǎn)。
1.2.3組胺、利血平與m-CPP[1-(3-氯ben基)]pai嗪頭痛模型Olesen用連續(xù)給予組胺、利血平與m-CPP作為另一個(gè)實(shí)驗(yàn)性頭痛模型，提示其中組胺作用明顯，它通過(guò)擴(kuò)張血管作用的H1受體,并涉及NO通道而發(fā)揮作用。
2、物理刺激法
2.1 熱刺激法
2.1.1 熱板法 選用雌性mouse,用熱板測(cè)痛儀測(cè)量mouse的痛閾（即痛反應(yīng)情況潛伏期,指mouse觸熱板至舔后足的時(shí)間）。對(duì)照組的痛閾按100%計(jì)算，求出給藥組的痛閾提高率。本法對(duì)組織損傷最小，動(dòng)物可反復(fù)利用，且簡(jiǎn)便易行，但對(duì)甾體類抗炎藥不太敏感。
2.1.2 輻射熱刺激甩尾法 mouse或rat，用全反射式電影放映燈泡發(fā)出光來(lái)，聚集照射，以啟動(dòng)光源至尾急速擺動(dòng)的時(shí)間為甩尾潛伏期測(cè)痛閾，計(jì)算痛閾提高百分率。該法裝置簡(jiǎn)單，操作方便，反應(yīng)恒定、靈敏，能準(zhǔn)確測(cè)出閾值及刺激強(qiáng)度。實(shí)用于麻醉性及非麻醉性陣痛藥物的篩選,是純粹的脊髓反射。
2.2.3 其他熱刺激法 采用一定功率之輻射熱，從下向上照射animal之腳底測(cè)定其回縮潛伏期，或采用后腳浸泡方法測(cè)試一定溫度下后腳回縮潛伏期；或采用后腳浸泡方法測(cè)試一定溫度下后腳回縮潛伏期；也有采用不同溫度的熱探頭刺激以觀測(cè)后腳回縮閾值.
2.2 冷刺激法-冷板法
將動(dòng)物置于保持在1℃~5℃金屬板上,觀測(cè)animal在一定時(shí)間內(nèi)后腳收縮的次數(shù)及后腳保持在空中的時(shí)間,以衡量anima對(duì)冷刺激的敏感性;carlton將后腳插入不同溫度冷水中以觀測(cè)后腳的回縮潛伏期 ;最近也有應(yīng)用丙酮及氯f(wàn)ang進(jìn)行冷刺激的方法.
2.3 電刺激法
2.3.1 電刺激-嘶叫法 常用mouse尾刺激和rabbit齒髓刺激的方法(以方波脈沖電刺激致痛),anima因疼痛可出現(xiàn)嘶叫反應(yīng),以嘶叫反應(yīng)為疼痛指標(biāo),觀察鎮(zhèn)痛作用,該方法簡(jiǎn)便易行,疼痛反應(yīng)指標(biāo)明確,重現(xiàn)性好,方法可靠,但個(gè)體差異較大。
2.3.2 電刺激三叉神經(jīng)偏頭疼模型 麻醉rat,沿正中線切開(kāi)皮膚,暴露顱骨,從前鹵向后3.7 mm,矢狀縫旁開(kāi)2.9~3.1 mm處,左右各鉆一直徑2 mm的小空,下置不銹鋼電極,經(jīng)股靜脈插管,深度為顱骨下9.2~9.7 mm,給于右側(cè)神經(jīng)電刺激(1.2 mA,5 Hz),持續(xù)5 min。一次性給予I標(biāo)記人血清白蛋白(125I-HAS),結(jié)果電刺增加了刺激側(cè)硬腦膜內(nèi)125I-HAS的滲出；刺激側(cè)血漿蛋白的滲出量隨刺激后時(shí)間的延長(zhǎng)而逐漸減少，而非刺激側(cè)I-HAS的滲出水平直到刺激后180 min未發(fā)生明顯波動(dòng)此模型造成rat硬腦膜內(nèi)血漿蛋白滲出，是一成功的神經(jīng)源性動(dòng)物疼痛模型。
2.4 機(jī)械性痛覺(jué)過(guò)敏模型
一般可用軟毛刷或鉛筆頭輕觸動(dòng)物的皮毛以測(cè)試animal對(duì)輕觸覺(jué)刺激的反應(yīng)，目前較常用的方法為應(yīng)用系列的Vonfry針絲壓迫皮膚以產(chǎn)生不同程度的壓力。可用這種針絲按從小到達(dá)的順序刺激動(dòng)物腳底記錄縮退之痛閾值（機(jī)械刺激回縮閾值），或以一定壓力的Vonfry針絲以一定頻率的反復(fù)刺激測(cè)試其后腿收縮頻率，動(dòng)物對(duì)這些刺激常表現(xiàn)為縮腳、逃跑、嘶叫及攻擊性行為。
3、神經(jīng)源性損傷模型
3.1 神經(jīng)瘤模型是20世紀(jì)70年代，由Wall及其同事首先介紹的神經(jīng)病理疼痛模型。方法是：rat，麻醉，于一側(cè)后肢大腿外側(cè)切開(kāi)皮膚，分離肌肉，暴露坐骨神經(jīng)干，在大腿中斷，用細(xì)細(xì)線緊扎神經(jīng)干，然后在結(jié)扎的遠(yuǎn)斷完全切開(kāi)神經(jīng)干，再將斷面的近中斷神經(jīng)干5~8 mm植入一端密閉的醫(yī)用聚乙烯管內(nèi)，最后縫合皮膚。通常在術(shù)后9~40 d，切斷的軸突形成神經(jīng)瘤，并長(zhǎng)出枝芽。該模型主要模擬臨床截肢后的幻肢痛和神經(jīng)全切斷以后的癥狀。動(dòng)物常表現(xiàn)為“自殘”（self-intilate）現(xiàn)象，盡管不知道自殘是否與進(jìn)行性病理疼痛有關(guān)，但這一模型已被廣泛用于外周神經(jīng)病理機(jī)制的研究，并取得了長(zhǎng)足的進(jìn)展。
3.2 背根節(jié)慢性壓迫實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ?(CCD)麻醉rat,于背部正中L4~L6部位切開(kāi)皮膚,分離脊椎一側(cè)肌肉,用L型探針頭按一定方向插入L5椎間孔約4 mm,然后抽出針頭再將不銹鋼針(長(zhǎng)4 mm,直徑0.5~0.8 mm)沿探針進(jìn)入方向與途徑插入L5椎間孔。本模型的特點(diǎn)是受損的DRG神經(jīng)元出現(xiàn)自發(fā)放電的頻率較高,并呈現(xiàn)多種放電節(jié)律形式,這一神經(jīng)元超興奮的客觀指標(biāo),為研究痛敏的細(xì)胞機(jī)制以及痛信號(hào)的起搏機(jī)制提供了有效的手段,該模型仍保留外周神經(jīng)的傳出與傳入功能,與臨床椎間孔狹窄和椎間盤突出等引起腰背痛和坐骨神經(jīng)痛的情況相似。
3.3慢性結(jié)扎損傷模型（CCI）
rat暴露坐骨神經(jīng)干,作3~4個(gè)輕度結(jié)扎,間距1mm,結(jié)扎強(qiáng)度以引起小腿肌肉輕度顫動(dòng)為宜,animal于5~7d開(kāi)始出現(xiàn)自發(fā)痛、痛敏、痛覺(jué)異常等，因此類似臨床的慢性疼痛癥狀，近年已成為應(yīng)用廣泛的神經(jīng)病的疼痛模型。
3.4段性脊神經(jīng)結(jié)扎損傷模型
將大鼠L5和/或L6脊神經(jīng)切斷或結(jié)扎,可以造成坐骨神經(jīng)的部分損傷,這種模型具有較明確的損傷定量和脊髓階段定位,而且有利于研究受損與未受損神經(jīng)纖維在疼痛機(jī)制中的作用。
3.5 外周神經(jīng)冰凍損傷模型
Deleo采用-60℃ 的冰凍探頭直接接觸坐骨神經(jīng)干而造成坐骨神經(jīng)冰凍損傷,該模型適用于研究暫時(shí)性外周神損傷引起的神經(jīng)源性疼痛。
3.6 其他神經(jīng)源性損傷模型
除以上模型外,還有多種通過(guò)不同損傷方法制備的神經(jīng)病理疼痛模型。例如,切斷一側(cè)坐骨神經(jīng)(1/3),引起雙側(cè)后肢痛敏;切斷支配區(qū)的交感神經(jīng),可以消除異常疼痛反應(yīng);在一側(cè)緊靠DRG的外周端,結(jié)扎1或2支腰部脊神經(jīng),可引起術(shù)側(cè)后肢長(zhǎng)達(dá)5~10周的疼痛反應(yīng),其優(yōu)點(diǎn)是損傷與正常的脊神經(jīng)完全分開(kāi),缺點(diǎn)是手術(shù)要切除L5或L6橫突,波及范圍較大。
4、內(nèi)臟牽拉痛動(dòng)物模型
目前國(guó)內(nèi)以有不少內(nèi)臟牽拉造成的疼痛模型,造模的方法有:用氣囊擴(kuò)張胃;用套塑料管的線繩拉胃;電刺激內(nèi)臟大神經(jīng)等。作為內(nèi)臟牽拉反應(yīng)的客觀指標(biāo)有:不同水平中樞的誘發(fā)電位,內(nèi)臟大神經(jīng)的反射性放電、肋間神經(jīng)放電、動(dòng)脈血壓、食道運(yùn)動(dòng)、動(dòng)物的胃腸外翻、掙扎、吼叫等。這些模型從不同角度給研究?jī)?nèi)臟疼痛積累了資料。
《中國(guó)實(shí)用醫(yī)藥》 2007年第34期